隨著科學技能和新式工業的發展,對化學試劑的純度、凈度以及精密度要求愈加嚴格和專門化。對試劑的加強管理。免疫檢測法的精確性表現為單次試驗孔間(批內)的重復性和多次試驗之間(批間)的重復性。CV值高則表明精確度低,ELISA試劑盒一般由以下兩個原因造成:洗刷技能和移液技能。
一、洗刷技能:
1. 假如運用自動洗板機或多通道移液器,請保證進出口能正常運作。
2. 最后一次洗刷后,翻轉酶標板倒出剩余的洗刷液,并在吸水紙上拍干液體。洗板太快或太慢都會降低精確度。不能讓孔內液體天然風干,需立即進行下一步操作。
3. 依照闡明書,添加足量的洗刷液至孔內,并保證洗刷*。
4. 由于洗刷液不是通用的,當試劑盒內的洗刷液用完時,請不要運用其他試劑盒中的洗刷液。如有需求,可聯絡技能支持尋求協助。
5. 不要減少洗刷時的浸泡時間或越過浸泡的過程。
6. 依照闡明書上引薦的洗刷次數清洗,隨意改變洗刷的次數會影響試驗的精確性。
二、移液技能:
1. 移液時,槍頭應對準孔中央,防止接觸孔壁及底部。
2. 移液后輕輕晃動混勻試劑。
3. 假如您的樣品具有黏性,請預先潤洗槍頭以消除表面張力的影響。吸液時等待頃刻使體積平衡后再取出。
4. 移液不充分或移液體積不均,闡明移液器需求校正。必要時請查看移液器并重新校正。
5. 加樣時,不同的試劑標準品和樣本間都要保證更換槍頭,防止穿插污染。
6. 保證運用適宜的槍頭。ELISA試劑盒不適宜的槍頭無法正確量取吸液和加樣的體積。
三、封板覆膜:
運用過的封板覆膜可能含有上一步試驗殘留的試劑,假如重復運用會造成孔板污染,從而導致精確性低。建議每一次孵育運用新的封板覆膜。
四、貯液瓶:
為防止污染,不同的試劑運用不同的貯液瓶。一些試劑或樣本很容易被污染(比如唾液、氧化劑等),請參考闡明書操作。必要時候采納一些預防措施維護溶液。